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人生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術(shù)解析與應(yīng)用指南

更新時(shí)間:2025-04-02      瀏覽次數(shù):254

人生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術(shù)解析與應(yīng)用指南

上海仁捷生物科技有限公司

摘要

人生長(zhǎng)分化因子15(Growth Differentiation Factor 15,GDF15)是一種重要的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白,在多種病理生理過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本文詳細(xì)介紹了上海仁捷生物科技有限公司自主研發(fā)的GDF15 ELISA試劑盒的技術(shù)原理、性能參數(shù)、操作流程及典型應(yīng)用案例,為研究人員提供全面的技術(shù)參考。

1. 產(chǎn)品概述

1.1 GDF15生物學(xué)意義

GDF15屬于TGF-β超家族成員,又稱MIC-1(macrophage inhibitory cytokine-1),具有以下重要功能:

  • 調(diào)控能量代謝平衡

  • 參與炎癥反應(yīng)

  • 影響腫瘤發(fā)生發(fā)展

  • 與心血管疾病密切相關(guān)

1.2 上海仁捷GDF15 ELISA試劑盒特點(diǎn)

  • 高靈敏度:檢測(cè)下限達(dá)10 pg/mL

  • 寬檢測(cè)范圍:50-1600 pg/mL

  • 優(yōu)異特異性:不與TGF-β家族其他成員交叉反應(yīng)

  • 穩(wěn)定可靠:批內(nèi)變異系數(shù)<8%,批間變異系數(shù)<10%

  • 多種樣本適用:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等

2. 技術(shù)原理

2.1 雙抗體夾心ELISA原理

本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心法:

  1. 包被:高親和力抗GDF15單抗預(yù)包被于微孔板

  2. 結(jié)合:樣本中GDF15與包被抗體特異性結(jié)合

  3. 檢測(cè):加入生物素標(biāo)記的二抗

  4. 信號(hào)放大:鏈霉親和素-HRP復(fù)合物結(jié)合

  5. 顯色:TMB底物顯色反應(yīng)

2.2 檢測(cè)系統(tǒng)優(yōu)化

  • 抗體配對(duì):經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選的高效抗體對(duì)

  • 信號(hào)放大:生物素-親和素放大系統(tǒng)

  • 干擾控制:特殊緩沖體系降低基質(zhì)效應(yīng)

3. 實(shí)驗(yàn)操作指南

3.1 樣本處理建議

樣本類型處理方法注意事項(xiàng)
血清室溫凝固30min后,2000×g離心15min避免溶血
血漿EDTA抗凝,離心去除血小板及時(shí)分離
細(xì)胞上清0.22μm濾膜過(guò)濾避免反復(fù)凍融

3.2 標(biāo)準(zhǔn)操作流程

  1. 試劑準(zhǔn)備(室溫平衡30min)

  2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL)

  3. 37℃孵育90min

  4. 洗板(自動(dòng)洗板機(jī)推薦)

  5. 加檢測(cè)抗體(100μL/孔)

  6. 37℃孵育60min

  7. 洗板

  8. 加酶結(jié)合物(100μL/孔)

  9. 37℃孵育30min

  10. 洗板

  11. 顯色(TMB,15min)

  12. 終止反應(yīng)

  13. 450nm讀數(shù)

3.3 數(shù)據(jù)分析

  • 四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線

  • 質(zhì)控要求:R2≥0.99

  • 推薦使用專業(yè)ELISA分析軟件

4. 典型應(yīng)用案例

4.1 心血管疾病研究

案例:急性心肌梗死患者血清GDF15動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)
方法:收集50例AMI患者發(fā)病后0、6、12、24、48h血清樣本
結(jié)果:GDF15水平在發(fā)病6h顯著升高,與心肌損傷程度正相關(guān)(r=0.72)

4.2 腫瘤研究

案例:結(jié)直腸癌患者預(yù)后評(píng)估
方法:檢測(cè)120例患者術(shù)前血清GDF15水平
結(jié)果:高GDF15組(>200pg/mL)5年生存率顯著低于低水平組(38% vs 72%)

4.3 代謝性疾病研究

案例:2型糖尿病肥胖患者干預(yù)研究
方法:檢測(cè)生活方式干預(yù)前后GDF15變化
結(jié)果:有效減重組GDF15下降幅度顯著(P<0.01)

5. 常見(jiàn)問(wèn)題解決方案

5.1 技術(shù)問(wèn)題排查

問(wèn)題現(xiàn)象可能原因解決方案
標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳標(biāo)準(zhǔn)品溶解不充分充分震蕩混勻
背景值高洗板不充分增加洗滌次數(shù)
重復(fù)性差操作不一致統(tǒng)一操作手法

5.2 結(jié)果解讀要點(diǎn)

  • 注意樣本采集時(shí)間(晝夜節(jié)律影響)

  • 考慮藥物干擾(如二甲雙胍可升高GDF15)

  • 結(jié)合臨床其他指標(biāo)綜合分析

6. 產(chǎn)品服務(wù)支持

6.1 上海仁捷特色服務(wù)

  • 免費(fèi)技術(shù)咨詢:專業(yè)團(tuán)隊(duì)提供實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)指導(dǎo)

  • 方法學(xué)驗(yàn)證服務(wù):協(xié)助完成方法學(xué)比對(duì)

  • 定制化服務(wù):可根據(jù)需求調(diào)整檢測(cè)范圍

關(guān)鍵詞:GDF15、ELISA試劑盒、上海仁捷生物、心血管標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物、代謝調(diào)控


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