ELISA實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意的問題有：樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品與試劑混合、樣品添加、培養(yǎng)等。上海ELISA試劑盒具有準(zhǔn)確度高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，深受廣大用戶的喜愛。
上海ELISA試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測(cè)樣本的種類：除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測(cè)樣本種類有：血清和血漿(不同抗凝劑)，細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;
上海ELISA試劑盒的檢測(cè)范圍：也就是標(biāo)曲范圍，特別要注意待測(cè)樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi)，對(duì)于濃度很高的樣本，可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測(cè)定樣本。
elisa中的稀釋線性及回收率：
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性，是將樣本梯度稀釋下來，看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的稀釋倍數(shù);
b.稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況，加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測(cè)定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測(cè)定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測(cè)樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在80%-120%比較合適;
上海ELISA試劑盒的其它指標(biāo)：
a.靈敏度：試劑盒能夠檢測(cè)到的樣本低濃度的能力，如果待檢指標(biāo)含量很低，需要選擇高靈敏度的ELISA試劑盒;
b.板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%):反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻，CV%一般小于10%比較好。
試劑盒的有效期：試劑盒的有效期一般是半年至一年，樣本準(zhǔn)備時(shí)間需要考慮到試劑盒的有效期。
ELISA法已被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測(cè)定中。ELISA的測(cè)定有許多影響因素。除了正常的反應(yīng)外，在檢測(cè)過程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤的結(jié)果。導(dǎo)致ELISA測(cè)定結(jié)果錯(cuò)誤的主要原因是：樣品因素；試劑因素；操作因素。
上海ELISA試劑盒樣品稀釋
常用產(chǎn)品的稀釋倍數(shù)由大量試驗(yàn)確定，以確保試驗(yàn)的敏感性和特異性。酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)(ELISA)是一種高度敏感的反應(yīng)。如果不稀釋血清，則不可避免地會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的非特異性反應(yīng)和假陽(yáng)性。
二.工具包平衡
所有ELISA試劑和試紙條應(yīng)在試驗(yàn)前與室溫(約25℃)保持平衡，并應(yīng)在室溫下放置20分鐘以上。過短的平衡時(shí)間會(huì)導(dǎo)致試劑混合不足、孵育時(shí)間縮短和ELISA反應(yīng)不足。在冬季低溫下，試劑盒可放置在37℃處20分鐘。
三.樣品和試劑的混合
上海ELISA試劑盒樣品在稀釋前后必須充分混合，所有試劑必須在加入樣品前搖勻，以確保試驗(yàn)的均勻性。
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更新時(shí)間：2019-07-25 
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